chromatography-40

high-performance size exclusion chromatograghy

Establishment of anticancer drug taxol detection of thin-layer chromatography ( TLC ) method, can be used for rapid screening of taxol producing strains. The paclitaxel standard or endophytic fungus fermentation liquid extract, point to m10-40particle size silica gel thin layer chromatography plate, with chloroform - methanol liquid chromatography as the expansion agent, and then immediately use containing1% vanillin sulphuric acid liquid spray color, study on paclitaxel characteristic blue spots. Taxol separation detection results, with the aid of taxol by thin layer chromatography and color reaction can be filtered to produce taxol endophytic fungi. Application of thin layer chromatography technique on endophytic fungi fermentation products were detected, which can conveniently, accurately to the screening of taxol producing strains, and strains can be speculated that taxol producing ability; to produce taxol medicinal fungi screening study, more efficient than HPLC method.。

也就这样了，太乱了

四极杆质谱仪的扩展应用

高效分子量排阻层析（HPSEC）又称高效凝胶过滤层析，它根据分子量大小来分离分子。凝胶基质由特定大小孔隙的球形小珠组成，不同分子量的分子从孔中排阻通过，发生分离。小分子进入孔内，会延滞它们通过层析柱，而大分子避开孔，洗脱入层析柱外水体积。因此，样品根据分子量大小进行分离，并依照分子量递减顺序洗脱。

依据层析目的和所需的分辨率来选择操作条件和介质。分子量排阻层析中一种常规的方法为基团分离，包括：

脱盐— 目标分子洗脱出来，而小分子保留在凝胶孔内。为了获得理想的分离，基质的分子量排阻限度应比目 标分子小。

分级分离— 一定分子量范围的分子在凝胶基质内分离。使用这种方法时，目标分子应当在凝胶的分级分离范 围以内。

高效分子量排阻层析常规应用包括蛋白分级分离及分子量确定、核酸分离、质粒纯化和多糖分级分离。

层析分辨率取决于颗粒大小、孔径大小、流速、层析柱尺寸和样品体积。通常，低流速（2–10 cm/hr）、细长 柱、小颗粒凝胶、小样品体积（总床体积的1–5%）、2 倍的分子量差异以及相同的溶液粘度，可以获得最高分辨率。 如果用于脱盐，样品体积则可达到总床体积的30–40%，并可使用短粗柱。

与分子筛层析(gel filtration chromatography)相比，HPSEC在分辨率以及分离时间上都具有明显的优势。

水质邻苯二甲酸二丁酯高效液相色谱法是怎么样的呢?

(Direct Measurement)。

四级杆质谱仪可作为直接测量仪器使用。

通过搭配不同的离子源，四级杆质谱仪则作为一般的分析化学工具使用。尤其在长期测量中，四级杆质谱仪产生的数据量要显著小于其他并行测量质谱（飞行时间质谱等）。 (Tendem Mass Spectrometry, MS-MS)。

由于四级杆质谱仪的解析能力(Resolving Power)偏低，因此在确定未知物质时的能力有所欠缺。通过多级质谱，离子在两组四级杆系统中间通过独立的腔体进行裂解操作。由此对特定质量的离子所产生的碎片进行分析，可得到该离子的结构信息。

裂解方法有注入气体与离子发生碰撞的撞击裂解法(Collision Induced Dissociation, CID)，也有直接通过电子枪射出电子裂解的方法(Electron Dissociation)。

多级质谱在生物化学以及有机化学中起到了至关重要的作用。 (Chromatography-Mass Spectrometry)。

色谱质谱联用中最典型的应用为气相色谱质谱法(Gas Chromatography-Mass Spectrometry, GC-MS)以及液相色谱质谱法(Liquid Chromatography-Mass Spectrometry)。

其优势在于通过色谱质谱的联用，解决了质谱中如果离子之间质量过于相似而无法分辨的情况。在色谱法中，滞留时间(Retension Time)给出了混合物中不同种类物质的结构信息，预分离操作提高了质谱设备的可信度。此方法类似于离子迁移率质谱法(Ion Mobility Spectrometry-MS, IMS-MS)。

应用此方法的难度在于如何耦合色谱设备与质谱设备。其中最常用的方法为电喷雾电离(Electrospray Ionization, ESI)。

高效液相色谱分析法的原理是什么？

含量=[（浓度X稀释倍数）/供试品称样量]X100%。

首先确定样品成分，获取该成分的纯品（对照品），将对照品溶液配制成与样品成分浓度相当的浓度（比如样品浓度是10mg/ml左右，对照品溶液就配制成10mg/ml）。

对照品溶液和供试品溶液分别进样，进行色谱分析，获得对照品成分峰面积与供试品溶液峰面积。

此时已知对照溶液峰面积，对照溶液浓度，求供试品溶液浓度，因为成分在液相中响应值不变，故对照品溶液浓度/对照品溶液峰面积=F（即响应因子）=供试品溶液浓度/供试品溶液峰面积，求得供试品溶液浓度。

扩展资料：

高效液相色谱法有“四高一广”的特点：

①高压：流动相为液体，流经色谱柱时，受到的阻力较大，为了能迅速通过色谱柱，必须对载液加高压。

②高速：分析速度快、载液流速快，较经典液体色谱法速度快得多，通常分析一个样品在15～30分钟，有些样品甚至在5分钟内即可完成，一般小于1小时。

③高效：分离效能高。可选择固定相和流动相以达到最佳分离效果，比工业精馏塔和气相色谱的分离效能高出许多倍。

④高灵敏度：紫外检测器可达0.01ng，进样量在μL数量级。

⑤应用范围广：百分之七十以上的有机化合物可用高效液相色谱分析，特别是高沸点、大分子、强极性、热稳定性差化合物的分离分析，显示出优势。

⑥柱子可反复使用：用一根柱子可分离不同化合物。

⑦样品量少、容易回收：样品经过色谱柱后不被破坏，可以收集单一组分或做制备。

高效液相色谱原理

高效液相色谱分析原理：

（一）高效液相色谱分析的流程：由泵将储液瓶中的溶剂吸入色谱系统，然后输出，经流量与压力测量之后，导入进样器。被测物由进样器注入，并随流动相通过色谱柱，在柱上进行分离后进入检测器，检测信号由数据处理设备采集与处理，并记录色谱图。废液流入废液瓶。遇到复杂的混合物分离（极性范围比较宽）还可用梯度控制器作梯度洗脱。这和气相色谱的程序升温类似，不同的是气相色谱改变温度，而HPLC改变的是流动相极性，使样品各组分在最佳条件下得以分离。

（二）高效液相色谱的分离过程：同其他色谱过程一样，HPLC也是溶质在固定相和流动相之间进行的一种连续多次交换过程。它借溶质在两相间分配系数、亲和力、吸附力或分子大小不同而引起的排阻作用的差别使不同溶质得以分离。

开始样品加在柱头上，假设样品中含有3个组分，A、B和C，随流动相一起进入色谱柱，开始在固定相和流动相之间进行分配。分配系数小的组分A不易被固定相阻留，较早地流出色谱柱。分配系数大的组分C在固定相上滞留时间长，较晚流出色谱柱。组分B的分配系数介于A，C之间，第二个流出色谱柱。若一个含有多个组分的混合物进入系统，则混合物中各组分按其在两相间分配系数的不同先后流出色谱柱，达到分离之目的。

不同组分在色谱过程中的分离情况，首先取决于各组分在两相间的分配系数、吸附能力、亲和力等是否有差异，这是热力学平衡问题，也是分离的首要条件。其次，当不同组分在色谱柱中运动时，谱带随柱长展宽，分离情况与两相之间的扩散系数、固定相粒度的大小、柱的填充情况以及流动相的流速等有关。所以分离最终效果则是热力学与动力学两方面的综合效益。

原文地址：http://www.qianchusai.com/chromatography-40.html