huvec

huvec可以分泌哪些细胞因子

（转载，仅供参考）

1． 37℃水浴预热培养液（HUVEC-004）。

2． 从液氮中取出HUVEC的细胞管，快速将其置入37℃水浴中解冻，直到管中只剩下最后一片结晶（注意：不要让水没过产品管）。 用75%的酒精擦拭产品管外壁。

3． 将HUVEC的细胞管中的细胞移至15ml无菌离心管中，慢慢逐滴加入预温的37℃ 基础培养液（HUVEC-004B）培养液4－5ml混匀，边加边摇匀。

4． 用1ml的培养液冲洗HUVEC的细胞管，向15ml离心管中加入冲洗的细胞悬液，边滴加边摇匀。

5． 取10μl细胞悬液和10μl台盼蓝混匀后，取10μl计数。

这一步骤非常重要，能确定您收到的产品是否合格（详见如何计数复苏的细胞）

6． HUVEC的细胞悬液在1500rpm，室温条件下，离心10分钟，去除上清。

7． 加HUVEC完全培养液4－5ml, 轻轻混匀细胞，备用。

8． 接种前将 T25培养瓶中的包被液吸去，按2500－5000个细胞/cm2接种细胞。（1支冷冻的细胞可以种一瓶T25培养瓶）

9. 每个HUVEC的细胞培养瓶中加完全培养液（HUVEC-004）3-5ml, 后置于37℃、5%CO2 培养箱内培养。

请教HUVEC的培养基

Treg具有免疫抑制功能，参与多种免疫性疾病的发生和发展过程。根据其免疫抑制机制不同分为CD4+CD25+Tr细胞、Tr1、Th3等。

CD4+CD25+Tr细胞通过活化T细胞的CTLA-4，抑制活化的T细胞的免疫功能。

Tr1分泌IL-10抑制T细胞的增殖分化。

Th3分泌TGF-β抑制效应细胞增殖和分化，同时抑制细胞因子的产生以降低其免疫功能。

请教HUVEC买细胞株好还是买原代的细胞好

培养HUVEC很多文献上用M199和DMEM也都可以，也可以试试用M199， 加20%FCS和适当的生长因子。如果培养原代,推荐用M200，

请教HUVEC买细胞株好还是买原代的细胞好。

原代细胞(primary cell) 是指从机体的组织(如人组织、小鼠组织、大鼠组织和兔组织等)经蛋白酶或其它的方法获得单个细胞并在体外进行模拟机体培养的细胞，称为原代细胞。一般认为，培养的原代的第1代细胞和传代到第10代以内的细胞统称为原代细胞培养。在人工条件下使其原代细胞生存、生长、繁殖和传代，进行细胞生命过程、细胞癌变、细胞工程等问题的研究。

细胞株(cell strain) 是通过选择法或克隆形成法从原代培养细胞中获得具有特殊性质或标志物的细胞称为细胞株。一般认为，细胞株是用单细胞分离培养或通过筛选的方法，由单细胞增殖形成的细胞群。细胞株的特殊性质或标志必须在整个培养期间始终存在。

细胞系(cell line) 是原代细胞经首次传代成功后即为细胞系。泛指一般可能传代的细胞。其中能够连续传代的细胞叫做连续细胞系或无限细胞系，不能连续培养的称为有限细胞系。大多数二倍体细胞为有限细胞系。由原先存在于原代培养物中的细胞世系所组成。如果不能继续传代，或传代次数有限， 可称为有限细胞系(finite cell line)， 如可以连续培养， 则称为连续细胞系(continuous cell line)， 培养50代以上并无限培养下去。人类肿瘤细胞，在体外培养半年以上，生长稳定，并连续传代的即可称为连续性株或系。

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