immunostaining

猫传腹症状与治疗方法

冰冻切片免疫荧光步骤

Frozen sectionimmunostaining steps 。

重点词汇释义

冰冻frozen; frost; freeze, freezing; gelivation。

免疫荧光immunofluorescence。

求助，帮忙翻译下

绝大多数患上此病的猫都很年轻，不会超过两岁，主要集中在3~16个月之间，这其中，又有一半小于12个月。

引起猫传腹的冠状病毒

猫冠状病毒（Feline Coronavirus Group）其实不是一种单独的病毒，而是一个病毒的属，包括很多不同的株型、血清型等，其中最常见的是猫肠道冠状病毒（Feline Enteric Coronavirus，FECV，FCoV）。

冠状病毒属RNA病毒，遗传物质由RNA组成而非DNA，而RNA对比DNA有一个很大的区别，那就是RNA不稳定，病毒会不断变异，这也是目前没有一款药物能够有效治疗猫传腹的主要原因。

冠状病毒突变速度极快，免疫系统往往刚知道如何对应，他就变异成另一种样子，导致免疫系统和疫苗都无法彻底消灭冠状病毒。冠状病毒遗传物质的不稳定性也让它们可以互相组合，从而产生新类型的毒株。

猫冠状病毒相比其他的猫RNA病毒如猫杯状病毒，能够达到三倍的体型差异（120纳米）。目前，猫冠状病毒有两大类，一型及二型。一型是原始版猫冠状病毒，二型据推是猫、狗冠状病毒的混合体。

而不管是一型或者二型，又都有两个形态：

1. 人畜无害型，最多造成腹泻、炎症，处于这种形态的冠状病毒会老实地呆在猫的大肠中。

2. 致命型，这种形态下的病毒经过变异，已经有能力离开肠道到其他器官进而威胁猫的生命，也就是猫咪患上传染性腹膜炎了。

猫传腹的传播

猫传腹本身不是一种传染性很强的疾病，因为当猫咪出现传腹症状时，只有少量的冠状病毒被释放出来，但是猫冠状病毒会通过污染物传播。

当猫咪急性感染冠状病毒（并不是患传腹），大量的病毒会存在于病猫的唾液和粪便中，通过接触直接传播，原发性感染能持续7-18个月，在此期间病毒的排出量达到最高。大部分猫咪粪便排毒持续2-3个月，少部分会持续排毒。

另外，病毒传播还可以发生在母猫和小猫之间，通常在小猫5到8周大的时候。

多猫家庭如果有一只猫有冠状病毒，那么其他猫咪大概率也会有，冠状病毒可以在干燥的环境中存活7周，有囊膜，因此生存能力较差，很容易被消毒剂灭活。

猫传腹症状

感染初期症状表现极不明显，精神不佳、食欲不良及皮毛无光杂乱往往是首先出现的症状，体重下降急速消瘦也是警告信号之一，但是太多猫病也有这样的症状，很难一下子判断具体病因。

湿性传腹感染的病变流程大致是这样的：

1. 出现顽固低烧，起初会怀疑细菌感染，开抗生素，随后发现用药也无法退烧。

2. 感染传腹病毒一段时间后，猫会出现贫血（非再生性贫血）

3. 胸腔积液聚集，这时候猫会显得呼吸困难。

4. 产生腹水，身体像梨形一般。触摸鼓胀的肚皮，猫没有不适感。

一些传腹属于“干性”传腹，不出现积液、腹水，病情发展也比较慢。尤其容易和其他疾病混淆。

湿性猫传腹

湿性传腹是最多见的传腹类型，腹腔、胸腔中出现积液是其特征之一。

这些液体的产生并非来自病毒的破坏，而是猫自己的免疫系统察觉到病毒入侵的自我防御但是却反应过度，免疫反应（发炎就是一种免疫反应）释放出液体混合物变成腹水，这种腹水粘稠、泛黄，混杂着蛋白质、白细胞、血浆。

传腹X光片

有腹水不一定就是传腹，胸腔出现粘稠积液可能是乳糜胸；肝脏疾病、肿瘤、低蛋白症也会导致腹腔出现积液。

干性猫传腹

小部分传腹没有出现胸腔和腹腔积液，或者说积液非常少的时候，就属于干性传染传腹。

当传腹病毒入侵猫的脏器，免疫系统作出防御反应，产生肉芽组织包裹、阻隔已经被病毒占据的身体组织，传腹病毒转而入侵眼睛、肝脏、肾脏、淋巴结、神经系统等，结合免疫系统作出的反应，什么症状都可能发生。

传腹病毒入侵的部位不同，出现的反应也各不相同，以典型的眼部、神经系统为例：

入侵眼部

身体免疫系统作出防御反应，眼部出现炎症。

出现这种症状，同时伴随神经系统问题，传染性腹膜炎的可能性就极高了。

入侵神经系统

行走不稳、萎靡不振、抽搐癫痫都是干性传腹猫可能出现的症状。罕见情况下，肝门静脉分流（Liver Shunts）这种可治愈疾病会产生如同干性传腹一般的症状，容易误诊。患有肝门静脉分流的猫咪持续发生间歇性抽搐，精神方面产生问题，最好做一次胆汁酸测定，确定是不是肝性脑病。

猫传腹的诊断

目前不存在针对性的传腹病毒检测手段，冠状病毒是不是已经变异到诱发传腹的程度，需要医生结合实际情况和有限的检测结果去做推断，也导致会造成很高的误诊率。

下面是一些可供参考的诊断依据，必须互相结合，再作判断：

1. 积液里含有大量球蛋白和炎性细胞（中性粒细胞、巨噬细胞、淋巴细胞），则传腹的几率很高。

2. 通过免疫染色法（Immunostaining）检测积液中的巨噬细胞，如果这些巨噬细胞是对抗冠状病毒的类型，那传染性腹膜炎的几率极高。

3. 通过检测抗体（titer），如果检查出猫体内存在极高的冠状病毒抗体，同时又存在明显的传腹症状，那传腹的几率极高。

4. 传腹患猫的往往淋巴细胞数量很低，血常规可检测。

5. 生化指标中的A/G（白蛋白/球蛋白）比指标在猫感染传腹的情况下会偏低。其中的G，即球蛋白（Globulin Protein）会超标。此时，结合其他症状可以判断是不是传腹。

6. 其他血检指标。血液中主要蛋白指标之一的白蛋白（Albumin/ALB）会降低，原因是传腹引发的慢性炎症。

冠状病毒抗体或者抗原检测是否能确诊？

这种检测只能让我们知道猫咪体内是否有冠状病毒，但是没办法区分致命的传腹病毒和普通的冠状病毒，这也是传腹经常误诊的主要原因。

1. 如果在胸腔、腹腔积液中检测到冠状病毒，传腹可能性很高。

2. 假若在肠组织外的身体组织中检测到高量冠状病毒，传腹可能性极高。

传腹试纸可否检测有无患病？

市面上厂商出售传染性腹膜炎检测试纸，这些试纸只能检测猫咪是否有冠状病毒，并不能区分致命的传腹病毒和近乎无害的普通冠状病毒。

猫传腹的治疗和预防

传腹的治疗

目前没有有效的传腹治疗方法。通常是针对症状进行支持性治疗，如良好的护理和营养，并减轻炎症反应的疾病。很多科学家正在研究传腹的治疗方法，但目前尚未有特效药的出现。国内目前能接触到的药物有GC376和GS441两种。如果猫咪患有传腹，一般都是直接尝试GS441，针剂是油剂叫比较疼（现在已经有片剂可供选择了，价格比针剂贵，但不疼，小猫咪接受度较高），15mg/ml浓度的注射剂量是0.3-0.5ml/kg体重/天，注意不要固定注射同一个部位，容易导致组织纤维化，后期注射不进去，第一个周打针后去医院复查，如果指标没有好转说明药效不好，抓紧时间换药。

抽液与蛋白质补充

患病猫咪的胸腔、腹腔会有积液，需要把这些液体抽走。抽出后，猫会舒服许多，呼吸也顺畅起来，然后这些积液会再次出现，此时又需要抽液。反复如此蛋白质会随之大量流失，所以在食物选择上尤其要注意给食高蛋白食品，比如罐头和肉食。

手动喂食

患病猫咪食欲精神都很差，不太会主动吃东西。尽量提供猫咪他爱吃的食物，一些医生会开“处方粮”，但是对传染性腹膜炎并没有什么意义，如果你的猫咪不爱吃，就不要吃。

陪伴与环境

猫咪病很重，需要安静舒适的环境。尽量避免嘈杂的环境和陌生人、猫、狗。这时候的猫咪大多比以往更粘人，多陪陪他，跟他聊聊天，哪怕他听不懂你说啥。

传腹的预防

关于预防，没有太多好的方法，都是一直强调的方法：

1. 保持环境整洁

2. 每天清理粪便，定期彻底清洗消毒猫砂盆。

3. 新进家的猫咪要做好隔离

4. 提供适当的营养

5. 尽量避免猫咪应激

tritonx-100是什么东西？

在我们研究,overexpression的厄尔和它中截头的突变体当一件有用工具用考核每一p53的厄尔领土向抑制的贡献的细节.我们发现厄尔拉长活动完全是对它的抑制p53的才能非必要的若不是完好无损ELL((eCT)存在要求在活的有机体内有约束力为和p53 transactivation的抑制.这些结果为ELL((eCT)为正常骨髓细胞改变的从前所报告的要求经过MLL-ELL((4,19)紧紧将用相联系和提供一分子的基础.有趣地,我们发现ELL((eCT)向是在镇压p21和apoptosis的建议ELL可以经受构象的p53-调停就职方面全身的厄尔把在上面熔化换成MLL结果是一ELL((eCT)的有p53的增强的相互作用更有效. 经过白血病的蛋白质使p53抑制符合ELL((eCT)向的注意到功能要求,同样的ELL的地区也是对MLL-厄尔用p53的共同本地化必要.它存在好证明了MLL-厄尔熔化随着野生型-MLL模式的本地化到来和形成不同核焦点,我们在我们研究中注意到的一现象,与此同时ELL展示弥漫的核玷污((3,24).As,我们结果展示p53被进入MLL-厄尔核焦点积极组织.但是,这是用MLL-ELL_CT注意到,亲身焦点组成不影响似乎可信在MLL-ELL的面前改正把p53分配是经过白血病的蛋白质抑制p53功能的机械装置之一正常p53亚核的localization.It存在. 进一步论及MLL-厄尔抑制的对p53的影响的机械装置,我们寻求辨认出经过MLL-ELL使它变得对抑制敏感的p53领土.我们结果牵扯到p53((泰德),地区这是既对必要又对p53和MLL-厄尔和厄尔的关系足够的.我们实验接近是和从前被其它调查者使用那个不同.而不是使用GST试金获得和在试管中我们估计的被翻译的蛋白质是功能反对的论点每一向ELLby的抑制的影响,学习p53/p73客迈拉的在存在或者没有在活的有机体内厄尔中可抄写的活动p53领土的tribution.那时我们在活的有机体内捆绑的试验和immunostaining,全部的令人信服地证明p53((泰德)是既对必要的又足够经过MLL-厄尔和厄尔使p53变得对抑制敏感的通过补充我们功能数据.。

co-immunostaining of edu什么意思

Triton

X-100是一种非离子型去垢剂。

分子式：C14H22O(C2H4O)n。

用途：Triton

X-100是一种比较温和的去垢剂（表面活性剂或称界面活性剂），常作为添加剂使蛋白保持稳定，尤其是膜蛋白。

性质：

1.

Triton

X-100对细菌等微生物没有杀伤作用。

2.

Triton

X-100在紫外波段下有光吸收（lambda。

max

275

nm

and

283

nm

in

methanol），因此，当缓冲液中存在Triton。

X-100时不能通过测定280nm光吸收来进行蛋白定量。

3.

Triton

X-100常与CHAPS等zwitterionic。

去垢剂一起使用来纯化膜蛋白，使膜蛋白保持其天然构象。

4.Triton

X-100可以提高真核细胞细胞膜的通透性，因此在Immunostaining时常使用含。

0.1%-0.5%Triton。

X-100的PBS或TBS。

5.

Triton

X-100非常稳定，密封避光

+2

to

+8℃条件下可以长期保存。

6.Triton

X-100是透明，略显粘稠，稍微发黄的液体。

7.

Triton

X-100的密度为1.07

g/ml，pH6.0-8.0（5%的溶液）。

8.

Triton

X-100可以高压灭菌。

9.

用Triton

X-100来裂解细胞时，0.1%。

Triton

X-100就足够了，不过，达到0.5%时也没问题。

10.

蛋白酶K在含1%

Triton

X-100的溶液中依然保持活性。

11.

可以使用Amberlite

hydrophobic

XAD

resins

and

Rezorian

A161

cartridges

来去除Triton

X-100

。

去垢剂(又称表面活性剂)是一类即具有亲水基又具有疏水基的物质，一般具有乳化、分散、和增溶作用，可分阴离子、阳离子和中性去垢剂等多种类型，中性去垢剂在蛋白提取中应用的较多。

中性去垢剂又称非离子表面活性剂，对蛋白质的变性作用影响较少，宜于蛋白质或酶提取之用。一般市售中性去垢剂有聚乙二醇类，如PEG200；多元醇类表面活性剂，如山梨醇、司盘类和吐温类；聚氧乙烯脂肪醇醚，如苄泽类、平平加类；聚氧乙烯烷基苯酚醚，如Igepal。

CO、乳化剂OP、Triton、Pluronic(用作消泡剂、润湿剂、增溶剂)、泡敌。中性去垢剂作用后可通过Sephadex。

LH-50柱除去；也可直接上DEAE-Sephadex柱层析分离目的蛋白，不必先除去去垢剂。

一段英文求翻译

co immunostaining of edu。

联合免疫染色法

重点词汇

eduEducational institutions 教研机构。

原文地址：http://www.qianchusai.com/immunostaining.html