alters-110

问题描述:童坦君的主要成就 大家好,小编来为大家解答以下问题,一个有趣的事情,一个有趣的事情,现在让我们一起来看看吧!

常见的开始-运行命令有哪些?

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20 世纪70 年代末童坦君教授揭示生物体液中存在抑癌活性物质,此物质对癌细胞有具有杀伤作用,但不抑制自身骨髓细胞。20 世纪90 年代初,他在肽类生长因子信号传递方面提出了生长因子干预原癌基因转录因子及DNA 甲基化的设想,所领导的研究组率先揭示表皮生长因子(EGF)具有降低某些原癌基因甲基化,促进染色质蛋白激酶活性,使某些原癌基因特异结合蛋白增多等作用,并对影响途径进行了系统的研究。

童坦君教授领导的研究组不仅揭示p16 基因在细胞衰老中的重要作用,并为延缓衰老研究提供了基因模型,为通过基因重组技术调节人类某些细胞的寿命提供了新依据。他们还在寻找衰老相关新基因、深入研究细胞其他重要衰老相关基因、信号传递通路方面做了大量系统的、创新性工作,克隆出延缓衰老的RDL 与加速衰老的TOM1 两种细胞衰老相关新基因,发现在细胞衰老相关基因之间存在着相互作用,p21 可促进p16 表达,这一促进作用是通过转录因子Sp1 引起的。此外,RDL 和TOM1 有可能是通过p16 影响细胞衰老的。 童坦君教授发表论文约200 篇,国际SCI 收录论文约40 篇。

1童坦君、张宗玉,医学老年学,人民卫生出版社,1995(第一版),2008(第二版)。

2童坦君、李刚,生物化学,北京大学医学出版社,2005(第一版),2009(第二版)。

3张宗玉、童坦君,健健康康活百岁 有滋有味过百年,北京大学医学出版社,2006。

4张乃蘅、童坦君,医学分子生物学,北京医科大学出版社,1999。

5童坦君、张宗玉,衰老机制及其学说,生理科学进展,2007,38(1):14~18。

6童坦君、张宗玉,衰老分子生物学在新世纪面临的机遇与挑战,中华老年医学杂 志,2000,19(3):167~169。

7童坦君、张宗玉,端粒酶的医学应用前景与局限性,中华医学杂志,2000,80(3):170~ 171。

8童坦君、张宗玉,阿尔茨海默病相关基因研究进展,中华医学杂志,1999,79(2):158~160 。

9张宗玉、童坦君,衰老与长寿的分子机理,香港老年学报,1997,11(1):30~37。

10张宗玉、范新青、童坦君,中国人外周血白细胞端区长度随增龄缩短,生物化学杂 志,1997,13(5):605~607。

11张宗玉、范新青、童坦君,人胚肺二倍体成纤维细胞端区长度的代龄变化,生物化学杂志 ,1997,13(1):43~45。

12童坦君、蔡家新,表皮生长因子对辐射转化的小鼠成纤维细胞细胞周期的调节作用,科学 通报,1995,40(12):1140~1143。

13蔡家新、童坦君,表皮生长因子对p34cdc2激酶活性的影响,生物化学与生物物理学 报,1994,26(4):423~426。

14彭勇、童坦君、张昌颍,表皮生长因子对DNA甲基化影响的研究,中国科学 (B辑),1993 ,23(3):291~296。

15彭勇、童坦君、张昌颍,表皮生长因子与正常细胞和恶性转化细胞核的结合,生物化学与 生物物理学报,1993,25(3):255~261。

16彭勇、童坦君,成纤维细胞表皮生长因子的胞吞和向细胞核转移研究,实验生物学 报,1993,26(3):179~86。

17童坦君、卢静轩,医学分子生物学面临的挑战与对策,中华医学杂志,1992,72(11):643 ~646。

18郑元盛、童坦君,表皮生长因子对neu基因表达的诱导作用,实验生物学报,1992,25 (4):413~416。

19黄平、石星源、 童坦君,小鼠成纤维细胞的辐射转化对染色质蛋白激酶活性的影响,生 物化学与生物物理学报,1990,22(5):483~486。

20童坦君、杨世欣、孙诠、吴平、张昌颍,小鼠血清脱氧核糖核酸结合蛋白的研究,科学通 报,1984,29(11):26~29。

21童坦君、孙诠、杨世欣、吴平、张昌颍,患癌小鼠血清脱氧核糖核酸结合蛋白的研究,中 华医学杂志,1984,64(5):291~293。

22周爱儒、童坦君、陈明,体液抑癌活性的专一性,中国科学(B辑),1980,(10):1011~ 1016。

23童坦君、陈明,体液的抑癌活性,中国科学,1978,(6):694~702。

24童坦君,蛋白质的生物合成,科学通报,1975,(4):162~172。

25童坦君、刘思职,肝癌大鼠的氨解毒及解毒机制的初步研究,生物化学与生物物理学 报,1965,5:618~627。

26Tian F,Tong TJ,Zhang Z.Y.,McNuttA,Liu XWAge-Dependent Down- Regulation of Mitochondrial 8-Oxoguanine DNA Glycosylase in SAM-P/8 Mouse Brain and Its Effect on Brain,Rejuvenation Research,2009,12 (3):209~215。

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one component system 单因子系统 是什么的相关图片

one component system 单因子系统 是什么

smss.exe Session Manager 。

csrss.exe 子系统服务器进程 。

winlogon.exe 管理用户登录 。

services.exe 包含很多系统服务 。

lsass.exe 管理 IP 安全策略以及启动 ISAKMP/Oakley (IKE) 和 IP 安全驱动程序。

svchost.exe  Windows 2000/XP 的文件保护系统 。

SPOOLSV.EXE  将文件加载到内存中以便迟后打印。) 。

explorer.exe 资源管理器 。

internat.exe 托盘区的拼音图标) 。

mstask.exe允许程序在指定时间运行。

regsvc.exe允许远程注册表操作。(系统服务)->remoteregister 。

winmgmt.exe  提供系统管理信息(系统服务)。

inetinfo.exe msftpsvc,w3svc,iisadmn 。

tlntsvr.exe  tlnrsvr 。

tftpd.exe 实现 TFTP Internet 标准。该标准不要求用户名和密码。

termsrv.exe  termservice 。

dns.exe  应答对域名系统(DNS)名称的查询和更新请求。

tcpsvcs.exe  提供在 PXE 可远程启动客户计算机上远程安装 Windows 2000 Professional 的能力。

ismserv.exe  允许在 Windows Advanced Server 站点间发送和接收消息。

ups.exe  管理连接到计算机的不间断电源(UPS)。

wins.exe 为注册和解析 NetBIOS 型名称的 TCP/IP 客户提供 NetBIOS 名称服务。

llssrv.exe证书记录服务 。

ntfrs.exe 在多个服务器间维护文件目录内容的文件同步。

RsSub.exe 控制用来远程储存数据的媒体。

locator.exe  管理 RPC 名称服务数据库。

lserver.exe  注册客户端许可证。

dfssvc.exe管理分布于局域网或广域网的逻辑卷。

clipsrv.exe  支持“剪贴簿查看器”,以便可以从远程剪贴簿查阅剪贴页面。

msdtc.exe 并列事务,是分布于两个以上的数据库,消息队列,文件系统或其它事务保护护资源管理器。

faxsvc.exe帮助您发送和接收传真。

cisvc.exe 索引服务 。

dmadmin.exe  磁盘管理请求的系统管理服务。

mnmsrvc.exe  允许有权限的用户使用 NetMeeting 远程访问 Windows 桌面。

netdde.exe提供动态数据交换 (DDE) 的网络传输和安全特性。

smlogsvc.exe 配置性能日志和警报。

rsvp.exe 为依赖质量服务(QoS)的程序和控制应用程序提供网络信号和本地通信控制安装功功能。

RsEng.exe 协调用来储存不常用数据的服务和管理工具。

RsFsa.exe 管理远程储存的文件的操作。

grovel.exe扫描零备份存储(SIS)卷上的重复文件,并且将重复文件指向一个数据存储点,以节省磁盘空间(只对 NTFS 文件系统有用)。

SCardSvr.ex  对插入在计算机智能卡阅读器中的智能卡进行管理和访问控制。

snmp.exe 包含代理程序可以监视网络设备的活动并且向网络控制台工作站汇报。

snmptrap.exe 接收由本地或远程 SNMP 代理程序产生的陷阱(trap)消息,然后将消息传递到运行在这台计算机上 SNMP 管理程序。

UtilMan.exe  从一个窗口中启动和配置辅助工具。

msiexec.exe 依据 .MSI 文件中包含的命令来安装、修复以及删除软件。

windows 2000/XP/2003服务全集 。

secedit.exe > Starts Security Editor help 自动安全性配置管理 。

services.exe > Controls all the services 控制所有服务 。

sethc.exe > Set High Contrast - changes colours and display mode Logoff to set it back to normal 设置高对比 。

setreg.exe > Shows the Software Publishing State Key values 显示软件发布的国家语言 。

setup.exe > GUI box prompts you to goto control panel to configure system components 安装程序(转到控制面板)

setver.exe > Set Version for Files 设置 MS-DOS 子系统向程序报告的 MS-DOS 版本号 。

sfc.exe > System File Checker test and check system files for integrity 系统文件检查 。

sfmprint.exe > Print Services for Macintosh 打印Macintosh服务 。

sfmpsexe.exe > 。

sfmsvc.exe > 。

shadow.exe > Monitor another Terminal Services session. 监控另外一台中端服务器会话 。

share.exe > Windows 2000 和 MS-DOS 子系统不使用该命令。接受该命令只是为了与 MS-DOS 文件兼容 。

shmgrate.exe > 。

shrpubw.exe > Create and Share folders 建立和共享文件夹 。

sigverif.exe > File Signature Verification 文件签名验证 。

skeys.exe > Serial Keys utility 序列号制作工具 。

smlogsvc.exe > Performance Logs and Alerts 性能日志和警报 。

smss.exe >

sndrec32.exe > starts the Windows Sound Recorder 录音机 。

sndvol32.exe > Display the current volume information 显示声音控制信息 。

snmp.exe > Simple Network Management Protocol used for Network Mangement 简单网络管理协议 。

snmptrap.exe > Utility used with SNMP SNMP工具 。

sol.exe > Windows Solitaire Game 纸牌 。

sort.exe > Compares files and Folders 读取输入、排序数据并将结果写到屏幕 。

SPOOLSV.EXE > Part of the spooler service for printing 打印池服务的一部分 。

sprestrt.exe > 。

srvmgr.exe > Starts the Windows Server Manager 服务器管理器 。

stimon.exe > WDM StillImage- > Monitor 。

stisvc.exe > WDM StillImage- > Service 。

subst.exe > Associates a path with a drive letter 将路径与驱动器盘符关联 。

svchost.exe > Svchost.exe is a generic host process name for services that are run from dynamic-link libraries (DLLs). 。

DLL得主进程

syncapp.exe > Creates Windows Briefcase. 创建Windows文件包 。

sysedit.exe > Opens Editor for 4 system files 系统配置编辑器 。

syskey.exe > Encrypt and secure system database NT账号数据库按群工具 。

sysocmgr.exe > Windows 2000 Setup 2000安装程序 。

systray.exe > Starts the systray in the lower right corner. 在低权限运行systray 。

taskman.exe > Task Manager 任务管理器 。

taskmgr.exe > Starts the Windows 2000 Task Manager 任务管理器 。

tcmsetup.exe > telephony client wizard 电话服务客户安装 。

tcpsvcs.exe > TCP Services TCP服务 。

.exe > Telnet Utility used to connect to Telnet Server 。

termsrv.exe > Terminal Server 终端服务 。

tftp.exe > Trivial FTP 将文件传输到正在运行 TFTP 服务的远程计算机或从正在运行 TFTP 服务的远程计算机传输文件 。

tftpd.exe > Trivial FTP Daemon 。

themes.exe > Change Windows Themes 桌面主题 。

tlntadmn.exe > Telnet Server Administrator Telnet服务管理 。

tlntsess.exe > Display the current Telnet Sessions 显示目前的Telnet会话 。

tlntsvr.exe > Start the Telnet Server 开始Telnet服务 。

tracert.exe > Trace a route to display paths 该诊断实用程序将包含不同生存时间 (TTL) 值的 Internet 控制消息协议 (ICMP) 回显数据包发送到目标,以决定到达目标采用的路由 。

tsadmin.exe > Terminal Server Administrator 终端服务管理器 。

tscon.exe > Attaches a user session to a terminal session. 粘贴用户会话到终端对话 。

tsdiscon.exe > Disconnect a user from a terminal session 断开终端服务的用户 。

tskill.exe > Kill a Terminal server process 杀掉终端服务 。

tsprof.exe > Used with Terminal Server to query results. 用终端服务得出查询结果 。

tsshutdn.exe > Shutdown the system 关闭系统 。

unlodctr.exe > Part of performance monitoring 性能监视器的一部分 。

upg351db.exe > Upgrade a jet database 升级Jet数据库 。

ups.exe > UPS service UPS服务 。

user.exe > Core Windows Service Windows核心服务 。

userinit.exe > Part of the winlogon process Winlogon进程的一部分 。

usrmgr.exe > Start the windows user manager for domains 域用户管理器 。

utilman.exe > This tool enables an administrator to designate which computers automatically open accessibility tools 。

when Windows 2000 starts. 指定2000启动时自动打开那台机器 。

verifier.exe > Driver Verifier Manager Driver Verifier Manager 。

vwipxspx.exe > Loads IPX/SPX VDM 调用IPX/SPX VDM 。

w32tm.exe > Windows Time Server 时间服务器 。

wextract.exe > Used to extract windows files 解压缩Windows文件 。

winchat.exe > Opens Windows Chat 打开Windows聊天 。

winhlp32.exe > Starts the Windows Help System 运行帮助系统 。

winlogon.exe > Used as part of the logon process. Logon进程的一部分 。

winmine.exe > windows Game 挖地雷 。

winmsd.exe > Windows Diagnostic utility 系统信息 。

wins.exe > Wins Service Wins服务 。

winspool.exe > Print Routing 打印路由 。

winver.exe > Displays the current version of Windows 显示Windows版本 。

wizmgr.exe > Starts Windows Administration Wizards Windows管理向导 。

wjview.exe > Command line loader for Java 命令行调用Java 。

wowdeb.exe > . For starters, the 32-bit APIs require that the WOWDEB.EXE task runs in the target debugee‘s VM 启动时,32位API需要 。

wowexec.exe > For running Windows over Windows Applications 在Windows应用程序上运行Windows 。

wpnpinst.exe > ? 。

write.exe > Starts MS Write Program 写字板 。

wscript.exe > Windows Scripting Utility 脚本工具 。

wupdmgr.exe > Starts the Windows update Wizard (Internet) 运行Windows升级向导 。

xcopy.exe > Used to copy directories 复制文件和目录,包括子目录 。

注:还有一些内部命令,参见2000的帮助文件,都是中文,大家自己看看吧 。

mountvol.exe > Creates, deletes, or lists a volume mount point. 创建、删除或列出卷的装入点。

mplay32.exe > MS Media Player 媒体播放器 。

mpnotify.exe > Multiple Provider Notification application 多提供者通知应用程序 。

mq1sync.exe > 。

mqbkup.exe > MS Message Queue Backup and Restore Utility 信息队列备份和恢复工具 。

mqexchng.exe > MSMQ Exchange Connector Setup 信息队列交换连接设置 。

mqmig.exe > MSMQ Migration Utility 信息队列迁移工具 。

mqsvc.exe > ? 。

mrinfo.exe > Multicast routing using SNMP 使用SNMP多点传送路由 。

mscdexnt.exe > Installs MSCD (MS CD Extensions) 安装MSCD 。

msdtc.exe > Dynamic Transaction Controller Console 动态事务处理控制台 。

msg.exe > Send a message to a user local or remote. 发送消息到本地或远程客户 。

mshta.exe > HTML Application HOST HTML应用程序主机 。

msiexec.exe > Starts Windows Installer Program 开始Windows安装程序 。

mspaint.exe > Microsoft Paint 画板 。

msswchx.exe > 。

mstask.exe > Task Schedule Program 任务计划表程序 。

mstinit.exe > Task scheduler setup 任务计划表安装 。

narrator.exe > Program will allow you to have a narrator for reading. Microsoft讲述人 。

nbtstat.exe > Displays protocol stats and current TCP/IP connections using NBT 使用 NBT(TCP/IP 上的 NetBIOS)显示协议统计和当前 TCP/IP 连接。

nddeapir.exe > NDDE API Server side NDDE API服务器端 。

net.exe > Net Utility 详细用法看/?

net1.exe > Net Utility updated version from MS Net的升级版 。

netdde.exe > Network DDE will install itself into the background 安装自己到后台 。

netsh.exe > Creates a shell for network information 用于配置和监控 Windows 2000 命令行脚本接口。

netstat.exe > Displays current connections. 显示协议统计和当前的 TCP/IP 网络连接。

nlsfunc.exe > Loads country-specific information 加载特定国家(地区)的信息。Windows 2000 和 MS-DOS 子系统不使用该命令。接受该命令只是为了与 MS-DOS 文件兼容。

notepad.exe > Opens Windows 2000 Notepad 记事本 。

nslookup.exe > Displays information for DNS 该诊断工具显示来自域名系统 (DNS) 名称服务器的信息。

ntbackup.exe > Opens the NT Backup Utility 备份和故障修复工具 。

ntbooks.exe > Starts Windows Help Utility 帮助 。

ntdsutil.exe > Performs DB maintenance of the ADSI 完成ADSI的DB的维护 。

ntfrs.exe > NT File Replication Service NT文件复制服务 。

ntfrsupg.exe > 。

ntkrnlpa.exe > Kernel patch 核心补丁 。

ntoskrnl.exe > Core NT Kernel KT的核心 。

ntsd.exe >

ntvdm.exe > Simulates a 16-bit Windows environment 模拟16位Windows环境 。

nw16.exe > Netware Redirector NetWare转向器 。

nwscript.exe > runs netware scripts 运行Netware脚本 。

odbcad32.exe > ODBC 32-bit Administrator 32位ODBC管理 。

odbcconf.exe > Configure ODBC driver‘s and data source‘s from command line 命令行配置ODBC驱动和数据源 。

os2.exe > An OS/2 Warp Server (os2 /o) OS/2 。

os2srv.exe > An OS/2 Warp Server OS/2 。

os2ss.exe > An OS/2 Warp Server OS/2 。

osk.exe > On Screen Keyboard 屏幕键盘 。

packager.exe > Windows 2000 Packager Manager 对象包装程序 。

pathping.exe > Combination of Ping and Tracert 包含Ping和Tracert的程序 。

pax.exe > is a POSIX program and path names used as arguments must be specified in POSIX format. Use 。

"//C/Users/Default" instead of "C:\USERS\DEFAULT." 启动便携式存档互换 (Pax) 实用程序 。

pentnt.exe > Used to check the Pentium for the floating point division error. 检查Pentium的浮点错误 。

perfmon.exe > Starts Windows Performance Monitor 性能监视器 。

ping.exe > Packet Internet Groper 验证与远程计算机的连接 。

posix.exe > Used for backward compatibility with Unix 用于兼容Unix 。

print.exe > Cmd line used to print files 打印文本文件或显示打印队列的内容。

progman.exe > Program manager 程序管理器 。

proquota.exe > Profile quota program 。

psxss.exe > POSIX Subsystem Application Posix子系统应用程序 。

qappsrv.exe > Displays the available application terminal servers on the network 。

在网络上显示终端服务器可用的程序 。

qprocess.exe > Display information about processes local or remote 在本地或远程显示进程的信息(需终端服务)

query.exe > Query TERMSERVER user process and sessions 查询进程和对话 。

quser.exe > Display information about a user logged on 显示用户登陆的信息(需终端服务)

qwinsta.exe > Display information about Terminal Sessions. 显示终端服务的信息 。

rasadmin.exe > Start the remote access admin service 启动远程访问服务 。

rasautou.exe > Creates a RAS connection 建立一个RAS连接 。

rasdial.exe > Dial a connection 拨号连接 。

rasphone.exe > Starts a RAS connection 运行RAS连接 。

rcp.exe > Copies a file from and to a RCP service. 在 Windows 2000 计算机和运行远程外壳端口监控程序 rshd 的系统之间复制文件 。

rdpclip.exe > RdpClip allows you to copy and paste files between a terminal session and client console session. 再终端和本地复制和粘贴文件 。

recover.exe > Recovers readable information from a bad or defective disk 从坏的或有缺陷的磁盘中恢复可读取的信息。

redir.exe > Starts the redirector service 运行重定向服务 。

regedt32.exe > 32-bit register service 32位注册服务 。

regini.exe > modify registry permissions from within a script 用脚本修改注册许可 。

register.exe > Register a program so it can have special execution characteristics. 注册包含特殊运行字符的程序 。

regsvc.exe > 。

regsvr32.exe > Registers and unregister‘s dll‘s. As to how and where it register‘s them I dont know. 注册和反注册DLL 。

regtrace.exe > Options to tune debug options for applications failing to dump trace statements 。

Trace 设置

regwiz.exe > Registration Wizard 注册向导 。

remrras.exe > 。

replace.exe > Replace files 用源目录中的同名文件替换目标目录中的文件。

reset.exe > Reset an active section 重置活动部分 。

rexec.exe > Runs commands on remote hosts running the REXEC service. 在运行 REXEC 服务的远程计算机上运行命令。rexec 命令在执行指定命令前,验证远程计算机上的用户名,只有安装了 TCP/IP 协议后才可以使用该命令。

risetup.exe > Starts the Remote Installation Service Wizard. 运行远程安装向导服务 。

route.exe > display or edit the current routing tables. 控制网络路由表 。

routemon.exe > no longer supported 不再支持了!

router.exe > Router software that runs either on a dedicated DOS or on an OS/2 system. Route软件在 DOS或者是OS/2系统 。

rsh.exe > Runs commands on remote hosts running the RSH service 在运行 RSH 服务的远程计算机上运行命令 。

rsm.exe > Mounts and configures remote system media 配置远程系统媒体 。

rsnotify.exe > Remote storage notification recall 远程存储通知回显 。

rsvp.exe > Resource reservation protocol 源预约协议 。

runas.exe > RUN a program as another user 允许用户用其他权限运行指定的工具和程序 。

rundll32.exe > Launches a 32-bit dll program 启动32位DLL程序 。

runonce.exe > Causes a program to run during startup 运行程序再开始菜单中 。

rwinsta.exe > Reset the session subsystem hardware and software to known initial values 重置会话子系统硬件和软件到最初的值 。

savedump.exe > Does not write to e:\winnt\user.dmp 不写入User.dmp中 。

scardsvr.exe > Smart Card resource management server 子能卡资源管理服务器 。

schupgr.exe > It will read the schema update files (.ldf files) and upgrade the schema. (part of ADSI) 读取计划更新文件和更新计划 。

accwiz.exe > Accessibility Wizard for walking you through setting up your machine for your mobility needs. 辅助工具向导 。

acsetups.exe > ACS setup DCOM server executable 。

actmovie.exe > Direct Show setup tool 直接显示安装工具 。

append.exe > Allows programs to open data in specified directories as if they were in the current directory. 允许程序打开制定目录中的数据 。

arp.exe > NETWORK Display and modify IP - Hardware addresses 显示和更改计算机的IP与硬件物理地址的对应列表 。

at.exe > AT is a scheduling utility also included with UNIX 计划运行任务 。

atmadm.exe > Displays statistics for ATM call manager. ATM调用管理器统计 。

attrib.exe > Display and modify attributes for files and folders 显示和更改文件和文件夹属性 。

autochk.exe > Used to check and repair Windows File Systems 检测修复文件系统 。

autoconv.exe > Automates the file system conversion during reboots 在启动过程中自动转化系统 。

autofmt.exe > Automates the file format process during reboots 在启动过程中格式化进程 。

autolfn.exe > Used for formatting long file names 使用长文件名格式 。

bootok.exe > Boot acceptance application for registry 。

bootvrfy.exe > Bootvrfy.exe, a program included in Windows 2000 that notifies the system that startup was successful. 。

Bootvrfy.exe can be run on a local or remote computer. 通报启动成功 。

cacls.exe > Displays or modifies access control lists (ACLs) of files. 显示和编辑ACL 。

calc.exe > Windows Calculators 计算器 。

cdplayer.exe > Windows CD Player CD播放器 。

change.exe > Change { User | Port | Logon } 与终端服务器相关的查询 。

charmap.exe > Character Map 字符映射表 。

chglogon.exe > Same as using "Change Logon" 启动或停用会话记录 。

chgport.exe > Same as using "Change Port" 改变端口(终端服务)

chgusr.exe > Same as using "Change User" 改变用户(终端服务)

chkdsk.exe > Check the hard disk for errors similar to Scandisk 3 Stages must specify a Drive Letter 磁盘检测程序 。

chkntfs.exe > Same as using chkdsk but for NTFS NTFS磁盘检测程序 。

cidaemon.exe > Component of Ci Filer Service 组成Ci文档服务 。

cipher.exe > Displays or alters the encryption of directories [files] on NTFS partitions. 在NTFS上显示或改变加密的文件或目录 。

cisvc.exe > Content Index -- It‘s the content indexing service for I 索引内容 。

ckcnv.exe > Cookie Convertor 变换Cookie 。

cleanmgr.exe > Disk Cleanup, popular with Windows 98 磁盘清理 。

cliconfg.exe > SQL Server Client Network Utility SQL客户网络工具 。

clipbrd.exe > Clipboard viewer for Local will allow you to connect to other clipboards 剪贴簿查看器 。

clipsrv.exe > Start the clipboard Server 运行Clipboard服务 。

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电影 理智与情感 里 萨士比亚的那段诗

单组成因素生产系统(one-component system):

所有的组成成分都集中在生产细胞中。经典的反转录病毒生产系统就是由产病毒细胞(VPC)组成,重组反转录病毒由VPC细胞不断分泌至培养上清中。这种生产系统操作最为简单,但是往往产量不高或不稳定。采用这种策略,需要将重组病毒产生所需要的所有元件都稳定地置于生产细胞中。由于许多病毒基因产物本身对细胞有破坏作用或不能在细胞中稳定表达,因此这种策略在许多病毒载体的生产中难以实施。

第一节 病毒载体产生的原理

病毒载体的产生建立在对病毒的生活周期和分子生物学认识的基础之上。研究病毒载体首先要对病毒的基因组结构和功能有充分的了解,最好能获得病毒基因组全序列信息。病毒基因组可分为编码区和非编码区。编码区基因产生病毒的结构蛋白和非结构蛋白;根据其对病毒感染性复制的影响,又可分为必需基因和非必需基因。非编码区中含有病毒进行复制和包装等功能所必需的顺式作用元件。

各种野生型病毒颗粒都具有一定的包装容量,即对所包装的病毒基因组的长度有一定的限制。一般来说,病毒包装容量不超过自身基因组大小的105~110%。

基因重组技术的发展使病毒载体的产生成为可能。最简单的做法是,将适当长度的外源DNA插入病毒基因组的非必需区,包装成重组病毒颗粒。比如,本实验室曾将4.5kb的lacZ基因表达盒(CMV-lacZ-polyA)插入HSV1病毒的UL44(糖蛋白C)基因的XbaI位点中,病毒基因组的其余部分不改变,构建成重组病毒HSV1-lacZ100(吴小兵等,1998)。由于UL44基因产物对于HSV病毒在培养细胞中产毒性感染是非必需的,因此,该重组病毒可以在细胞中增殖传代。用这种重组病毒感染细胞,能将lacZ基因带入细胞并高效表达。用同样的方法,将AAV-2病毒的rep和cap基因片段(4.3kb)插入HSV1病毒的UL2(编码尿嘧啶DNA糖基化酶)或UL44(编码糖蛋白C)基因中,构建成具有提供重组AAV载体复制和包装所需的全部辅助功能的辅助病毒rHSV-rc(伍志坚等,1999)。

然而,这样的重组病毒作为基因转移载体有许多缺点。首先,许多野生型病毒通过在细胞中产毒性复制而导致细胞裂解死亡;或带有病毒癌基因而使细胞发生转化。因此必须经过改造使其成为复制缺陷性病毒并且删除致癌基因后才能用于基因治疗。其次,插入外源DNA的长度受到很大限制,尤其对于基因组本身较小的病毒如腺病毒伴随病毒(AAV,4.7kb)、反转录病毒(8~10kb)、腺病毒(36kb),如果不去除病毒基因,可供外源DNA插入的容量就十分小。因此,必须删除更多的病毒基因以腾出位置插入较大的外源DNA。 为了增加病毒载体插入外源DNA的容量,除了可以删除病毒的非必需基因外,还可以进一步删去部分或全部必需基因,这些必需基因的功能由辅助病毒或包装细胞系反式提供。

病毒载体大体上可分为两种类型:

重组型病毒载体:这类载体是以完整的病毒基因组为改造对象。一般的步骤是选择性地删除病毒的某些必需基因尤其是立早基因或早期基因,或控制其表达;缺失的必需基因的功能由互补细胞反式提供;用外源基因表达单位替代病毒非必需基因区;病毒复制和包装所需的顺式作用元件不变。这类载体一般通过同源重组方法将外源基因表达单位插入病毒基因组中。如在传统的重组腺病毒构建方法中,将外源基因表达盒(exogenous gene expression cassette)插入穿梭质粒(如pXCX2或pFGdX1)的腺病毒同源序列中,与辅助质粒(含有腺病毒基因组的质粒如JM17或pBHG)共转染293细胞,通过细胞内的同源重组获得含有外源基因的重组腺病毒(Graham FL and Prevec L 1995)。

无病毒基因的病毒载体(gutless vectors):这类载体在不同的病毒载体系统中的称谓不同。对于腺病毒,一般称为mini-Ad;在HSV载体系统,一般称为扩增子(amplicon)载体或质粒型载体。重组AAV载体也属于无病毒基因的病毒载体。这类载体系统往往由载体质粒和辅助系统组成。重组载体质粒主要由外源基因表达盒、病毒复制和包装所必需的顺式作用元件及质粒骨架组成。辅助系统包括病毒复制和包装所必需的所有反式作用元件。在辅助系统的作用下,重组载体质粒(包含或不包含质粒骨架)以特定形式(单链或双链,DNA或RNA)被包装到病毒壳粒中,其中不含有任何病毒基因。这类病毒载体的优点在于载体病毒本身安全性好,容量大。缺点在于往往需要辅助病毒参与载体DNA的包装,而辅助病毒又难以同载体病毒分离开来,造成最终产品中辅助病毒污染,从而影响其应用。实际上,无病毒基因的病毒载体可以看作是重组病毒载体的一种极端减毒情况。

表1列举了几种常见的病毒载体的顺式作用元件和经典的包装方式。 载体 顺式作用元件 经典包装方式 。

反转录病毒载体

1) 两个长末端重复序列(LTR):含有整合和调节转录的必需序列;含有转录增强子和启动子;

2) tRNA 引物结合位点p;

3)包装信号序列ψ。

载体质粒转染整合了所有必需基因(gag,pol,env)的包装细胞系如PA317,经选择培养获得产病毒细胞系(VPC);细胞不裂解,病毒不断分泌至培养上清中。

腺病毒载体

两个末端倒转重复序列(ITR);

包装信号序列。

载体质粒与辅助质粒共转染293细胞获得重组腺病毒。重组腺病毒感染293细胞而扩增;细胞每次被感染后发生裂解。

腺病毒伴随病毒载体

两个末端倒转重复序列(ITR);其中包括了病毒复制起点、包装信号及整合和拯救所必需的顺式元件。

AAV载体质粒和辅助质粒共转染293细胞,并加辅助病毒(腺病毒或单纯疱疹病毒)感染。

单纯疱疹病毒载体

HSV 病毒复制起点ori; 病毒包装信号pac 。

PTCA重组病毒在互补细胞上传代;

扩增子病毒在辅助病毒存在下传代。

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第二节 病毒载体的包装系统

将外源基因包装到病毒壳粒中,是病毒载体生产的核心技术。一般地,病毒载体的制备包括以下要素:

宿主细胞

虽然现在已有可能对有些病毒载体(如AAV载体)进行体外(无细胞)包装(Zhou XH et al . 1998; Ding L et al. 1997),但是这种包装系统仍然需要细胞提取物,并且包装效率相当低,远远达不到可生产水平。至今为止,病毒载体的包装主要是在对该病毒敏感的宿主细胞中进行的。宿主细胞不但提供了病毒复制和包装的环境条件,许多细胞成分还直接参与了病毒复制和包装的过程。

病毒复制和包装所必需的顺式作用元件和外源基因的表达盒。

一般地,病毒复制和包装所必需的顺式作用元件和外源基因的表达盒由细菌质粒携带,组成病毒载体质粒,是被包装的对象。由于病毒复制方式的不同,有些病毒载体如单纯疱疹病毒扩增子(HSV amplicon)载体在包装时,整个载体质粒都被包装进入病毒颗粒中;而有些病毒载体如反转录病毒、腺病毒伴随病毒载体的质粒骨架部分并不被包装到病毒颗粒中,只有病毒复制和包装所必需的顺式作用元件和外源基因表达盒被包装到病毒颗粒中。

构建重组型病毒载体时,病毒复制和包装所需的顺式作用元件存在于病毒基因组中(病毒基因组可以由具有感染性的病毒颗粒提供,也可以质粒形式提供)。先将外源基因表达盒插入穿梭质粒携带的病毒同源序列中;将重组穿梭质粒转染至细胞中,再用辅助病毒超感染;或将重组穿梭质粒与病毒基因组质粒共转染细胞;重组质粒与病毒基因组在细胞中进行同源重组而产生表达外源基因的重组病毒。 重组腺病毒(Graham FL and Prevec L 1995)和重组单纯疱疹病毒(Pyles RB et al. 1997;Kramm CM et al. 1997)的传统制备方法都是采用这种方式。

为了使病毒载体的生产更为方便,病毒复制和包装所必需的顺式作用元件和外源基因的表达盒除了可以用质粒携带以外,也可以用另一种病毒(往往是辅助病毒)或生产细胞来携带。

辅助元件

包括病毒复制和包装所必需的所有反式作用元件。这些元件一般包括病毒基因转录调控基因、病毒DNA合成和包装所需的各种酶类的基因、病毒的外壳蛋白基因等。辅助元件的表现形式可以多种多样。常用的形式有:

① 辅助质粒(helper plasmid),如用于产生重组腺病毒的质粒JM17,用于重组AAV包装的辅助质粒pAAV/Ad(Rolling F and Samulski J 1995)等;

② 辅助病毒(helper virus),如用于HSV 扩增子载体包装的辅助病毒HSV1 tsK株;

③ 包装细胞系如用于反转录病毒载体包装的PA317细胞。

这些表现形式之间可以相互转化或合并。例如,辅助病毒可以转化为辅助质粒:传统的AAV载体生产系统常用腺病毒作为辅助病毒。研究发现,并非腺病毒的所有基因对AAV病毒的产生都是必需的,只需要腺病毒E1a, E1b, E2a, E4和VA RNA 5种基因就行了。因此,将这5种基因置于同一个质粒中,构建成的这种新的辅助质粒就完全可以替代原来的辅助病毒(Xiao X et al. 1998; Grimm D et al. 1998 ),不但提高了包装效率,而且避免了产品中腺病毒污染的问题。

上述几种要素的不同组合,便产生了各种各样的病毒载体包装策略。根据病毒载体生产系统的组成因素的多少,可将其分成以下几种:

单组成因素生产系统(one-component system):

所有的组成成分都集中在生产细胞中。经典的反转录病毒生产系统就是由产病毒细胞(VPC)组成,重组反转录病毒由VPC细胞不断分泌至培养上清中。这种生产系统操作最为简单,但是往往产量不高或不稳定。采用这种策略,需要将重组病毒产生所需要的所有元件都稳定地置于生产细胞中。由于许多病毒基因产物本身对细胞有破坏作用或不能在细胞中稳定表达,因此这种策略在许多病毒载体的生产中难以实施。

双组成因素生产系统(two-component system)

这种生产系统一般由"一株病毒/一株细胞"组成。典型的例子是重组腺病毒生产系统。先用共转染的方法获得重组腺病毒毒种,再由该毒种和生产细胞(如293细胞)组成一个双组成因素的生产系统使病毒大量扩增。

多组成因素生产系统(multi-component system)

是由两种以上的组成因素组成的生产系统。传统的AAV载体生产系统就是由载体质粒,辅助质粒,辅助病毒和生产细胞4种因素组成。这种策略的缺点是影响因素多,操作复杂,产量不容易稳定,不利于大规模生产。 以上各种生产系统也可以相互转化。我们实验室通过将上述AAV载体生产系统的4种因素进行两两合并,即将辅助质粒和辅助病毒合并成一种重组的辅助病毒,将载体质粒和生产细胞合并成AAV前病毒细胞株,成功地将其转化成一种双组成因素的新型高效生产系统(伍志坚等,1999)。

一般来说,发展新的包装策略主要是为了以下几种目的:

(1) 减少生产系统中的组成因素,简化操作过程;

(2)提高生产效率,降低生产成本;

(3)避免或降低野生型病毒的产生;

(4)避免使用难以与产品病毒分离的辅助病毒。

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第三节 病毒载体的纯化方法

重组病毒的纯化与基因工程产品的纯化既有许多共性,又有显著的不同之处。病毒可以看作是一个具有特定结构的生物大分子,一般都由位于中心的核酸和包裹于其外的蛋白外壳组成。有些病毒还具有脂质膜和糖蛋白或糖脂。许多分离纯化蛋白质的方法如离心和梯度离心、盐析、柱层析、超滤、透析等方法都可用于病毒的纯化。然而,由于病毒结构的复杂性,纯化时不能采用蛋白质变性和复性的方法,因为一旦病毒蛋白发生变性,或病毒结构发生破坏,在体外就很难再重建成有感染性的病毒颗粒。因此,在病毒的纯化过程中必须保持病毒的结构不受破坏,并且监测其感染活性。

病毒的纯化一般分为以下几个步骤:

初始物(start material)的收集或制备。

根据病毒产生方式的不同而采取不同的方式。对于不导致细胞病变和死亡的病毒如反转录病毒,可不断收集产毒细胞(VPC细胞)的培养上清作为初始物;对于在生产病毒过程中宿主细胞发生病变和死亡的病毒如腺病毒,在病毒产生达到高峰时,收集培养上清,并裂解细胞以释放细胞内的病毒。

培养上清和细胞裂解液都可作为纯化的初始物。在实验室的小规模制备中,往往采用将培养上清与细胞一起反复冻融3~4次的方法制备细胞裂解液作为初始物。对于初始物体积大于500ml的较大规模的制备,则需要考虑采用不同初始物的损益率。如果收集时大部分(90%以上)目标病毒仍存在于细胞中,为了减少操作大体积初始物带来的不便,可以考虑放弃上清中含有的目标病毒,而通过低速离心收集细胞,重悬于较小体积的缓冲液中进行细胞裂解制备细胞裂解液。对于腺病毒和AAV病毒的大规模制备都可以采用这种方式。如果通过延长培养时间可以使大部分的目标病毒释放到培养液中,也可以只收集培养上清而弃去细胞,从而省去反复冻融的步骤。

除了用反复冻融方法裂解细胞外,还可以根据目标病毒的生物学性质采用其它不影响其感染性的方法,如超声法、化学法(如在AAV病毒制备中用脱氧胆酸或氯仿)等。

初始物的浓缩

当初始物体积较大时,要考虑对其进行浓缩后再分离纯化。浓缩时最好同时能获得初步纯化对于效果。 在不影响目标病毒的感染性的前提下,可选用盐析、超滤、透析等方法进行浓缩。盐析法不仅可以用来浓缩初始物,同时也能达到一定的分离纯化效果。最常用的盐是硫酸铵;许多病毒如腺病毒、AAV病毒和单纯疱疹病毒用聚乙二醇/氯化钠系统沉淀可获得很好的效果并且不影响病毒的感染性。

目标病毒的分离纯化

氯化铯密度梯度离心法至今仍是分离纯化各种病毒的最常用方法。主要是依据不同病毒具有特征性的浮力密度,使其与细胞裂解液中的其它成分分离开来。收集到目标病毒特异的组分后,用透析法除去其中的氯化铯,获得纯化的病毒。用这种方法有时可获得极高纯度的病毒。目前在临床实验中应用的重组腺病毒大都是用这种方法进行纯化的。然而,这种方法也存在明显的弊病,主要是费时且操作难度较大,重复性较差;并且氯化铯对人体有毒性。因此随着基因治疗研究和应用的发展,用这种方法纯化的重组病毒可能不能适应人体内应用的要求。

用柱层析法尤其是亲和层析法分离纯化病毒可能成为用于临床的重组病毒载体大量纯化的主要方向。将病毒的特异性受体、抗体或化学合成的配体偶联在层析基质上并制备成亲和层析柱。将含有目标病毒的初始物经简单处理后直接上柱,最后洗脱和收集目标病毒。这类方法最近在AAV病毒载体的纯化中得到很高评价(Summerford C and Samulski J 1999)。

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第四节 病毒载体在基因治疗中的应用。

自1989年开展第一例人体基因转移(标记基因)以来,据不完全统计,至今已开展了近400项基因治疗临床试验,涉及病人1000余人。2/3以上的临床方案中应用了病毒载体进行基因导入。

由于各种的病毒载体具有其特定的生物学特性,这些特性决定了其在基因治疗中的应用。

表2列举了常用的病毒载体的特性和适用范围 载体 顺式作用元件 经典包装方式 。

反转录病毒载体

1) 两个长末端重复序列(LTR):含有整合和调节转录的必需序列;含有转录增强子和启动子;

2) tRNA 引物结合位点p;

3)包装信号序列ψ。

载体质粒转染整合了所有必需基因(gag,pol,env)的包装细胞系如PA317,经选择培养获得产病毒细胞系(VPC);细胞不裂解,病毒不断分泌至培养上清中。

腺病毒载体

两个末端倒转重复序列(ITR);

包装信号序列。

载体质粒与辅助质粒共转染293细胞获得重组腺病毒。重组腺病毒感染293细胞而扩增;细胞每次被感染后发生裂解。

腺病毒伴随病毒载体

两个末端倒转重复序列(ITR);其中包括了病毒复制起点、包装信号及整合和拯救所必需的顺式元件。

AAV载体质粒和辅助质粒共转染293细胞,并加辅助病毒(腺病毒或单纯疱疹病毒)感染。

单纯疱疹病毒载体

HSV 病毒复制起点ori; 病毒包装信号pac 。

PTCA重组病毒在互补细胞上传代;

扩增子病毒在辅助病毒存在下传代。

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第五节 安全性检测

总的来说,病毒载体制剂的安全性检测主要涉及以下几个方面(Aderson RW 1996):

有复制能力的病毒(replication competent virus, RCV)

RCV一般产生于重组病毒生产过程中基因重组事件。由于RCV具有复制能力,在生产过程中一旦出现,就可能呈现优势生长,从而影响载体病毒的产量;另外,含有RCV的制品用于人体内可能导致严重的病毒感染或急性/慢性病毒血症。

RCV是对用于基因治疗的病毒载体制剂安全性检测的特有项目。检测RCV的方法因不同的病毒载体而异。对于反转录病毒载体,检测有复制能力的反转录病毒(RCR)的方法主要是PG4 S+L- 分析法;也可采用其它的变通方法。对于腺病毒载体,检测有复制能力的腺病毒(RCA)主要采用空斑分析方法及PCR方法。

辅助病毒

对于生产过程需要辅助病毒参与的病毒载体如AAV病毒载体,由于这些辅助病毒本身具有复制能力并对机体细胞有破坏性,因此检测病毒制剂中的辅助病毒如腺病毒或单纯疱疹病毒的残存量十分重要。

其它成分的污染

检测指标包括细菌、霉菌、支原体、内毒素等及在纯化过程中所用试剂如氯化铯等的残余量。

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第六节 病毒载体的发展方向

基因治疗研究的快速发展对基因导入系统提出了越来越高的要求。病毒载体的发展也日新月异,包括对已有病毒载体的不断改进和完善,和越来越多的其它病毒被改造成为新的病毒载体。病毒载体的发展方向可归纳成以下几个方面:

简便、高效的病毒载体包装系统:考虑到包装的高效性和操作的简便性,越来越多的病毒载体生产系统将采用双组成因素系统。这种系统容易用于病毒载体的大规模生产(Liu XL et al.1999; Conway JE et al. 1999 )。

无病毒基因的病毒载体(gutless viral vector):去除病毒载体中所有的病毒基因,只保留其复制和包装所必需的顺式作用元件,是病毒载体的重要发展方向。这种策略可最大限度地扩大载体的容量和减少病毒对细胞的直接毒性和病毒蛋白表达引起的免疫毒性。 腺病毒的微载体(mini-Ad)、AAV载体、HSV扩增子载体都是无病毒基因的病毒载体。这一发展方向需要解决的主要问题是建立高效、安全(无辅助病毒污染)的包装系统。

可调控表达外源基因的病毒载体:在许多疾病的基因治疗中,实现外源基因的可调控表达十分重要。如糖尿病的基因治疗,外源的胰岛素基因的表达最好能受血糖水平的调控;肾性贫血的基因治疗,EPO基因的表达最好能受血氧含量的调控等。目前所研究的表达调控系统主要包括各种药物诱导的表达"开关"。其中四环素控制系统(Tet-on和Tet-off)是人工设计的一种基因表达调控模式。这个系统在体外和动物体内实验中都表现出良好的表达调控作用(Fotaki ME et al.1997; Miller N and Whelan J 1997)。然而,由于其中的反式作用蛋白(tTA或rtTA)是异种蛋白,在机体内可能引起毒性作用和免疫反应,因此用于人体前还需考虑其安全性和长期有效性。

最近Binley K等(1999)报道了用缺氧反应元件(hypoxia response element ,HRE)腺病毒载体中外源基因的表达。缺氧可激活bHLH/PAS 家族转录因子的表达,它们可结合HRE核心序列上,诱发其下游基因的表达。

自我扩增型载体(self-amplifying vector)(Herweijer H and Wolff JA 1997):目前的基因转移方法基因转移的效率仍相对较低,尤其是在体内。为了提高外源基因表达总水平,除了提高基因转移效率外,另一种方法是尽量提高外源DNA在细胞中的表达水平。用自我扩增型的表达载体是达到此目的的方法之一。这些载体是以正链RNA病毒Sindbis病毒和Semliki Forest 病毒为基础的。用目的基因代替病毒的外壳蛋白编码序列,导入靶细胞中,病毒的复制蛋白大量复制重组的基因组,mRNA水平的大量增加导致高水平的转导基因表达。自我扩增型载体的表现形式可以是RNA,DNA和重组病毒。

特异性复制型性病毒载体(specifically replicating vector):指可在某种特性的组织中产毒性复制,而在其它组织中不增殖的病毒载体。这类病毒载体主要用于特异性裂解肿瘤细胞。如腺病毒突变株Onyx-015是55Kdal E1B基因功能缺失的腺病毒突变株,可以选择性地在p53基因突变的肿瘤细胞中增殖,而在正常组织细胞中不增殖。用这种突变株联合化疗治疗恶性肿瘤II期临床结果令人鼓舞(Kirn D et al. 1998),已进入III期临床试验,从此,许多人工改造的腺病毒突变体被用于肿瘤治疗研究中。如将腺病毒E1基因的表达用甲胎蛋白(AFP)启动子控制,使得该病毒只能在甲胎蛋白阳性的肝癌细胞中增殖导致细胞死亡。也可以将这种病毒的基因组分开装在两个互补的缺陷性腺病毒载体上(Alemany R et al. 1999),其中一个载体除了腺病毒复制和包装所必需的顺式作用元件外,只含有E1区基因,其中E1A基因的表达受AFP启动子的控制;另一个载体为E1区缺失的重组腺病毒。这两个载体同时感染AFP阳性的肝癌细胞时,病毒可不断增殖而引起细胞死亡;对于AFP阴性的细胞,E1A基因不表达,因而病毒不能增殖。类似的设计在HSV载体系统也有报道。除了用甲胎蛋白作为反式激活因子外,各种其它组织特异性表达的蛋白和调控序列都可被用来控制病毒的增殖。

嵌合型病毒载体(hybrid viral vector):是指将不同病毒的基因元件进行组合,形成的重组杂合病毒。如腺病毒与AAV病毒的杂合体病毒,既具有腺病毒的感染性和基因组特性(双链线状DNA),又具有AAV病毒的染色体整合性(Lieber A et al. 1999)。各种病毒基因元件组合形成新的杂合载体的报道层出不穷,如单纯疱疹病毒扩增子与AAV病毒杂合载体(Johnston KM et al. 1997)、腺病毒与EB病毒复制子杂合载体(Tan BT et al. 1999)腺病毒与反转录病毒杂合载体(Caplen NJ et al. 1999)等,不一而足。这些杂合载体使重组病毒的特性多样化,以适应不同基因转移目的的需要。

靶向性病毒载体(targeted viral vector):是指能特异性地结合并感染某种细胞的病毒载体。靶向性病毒载体的产生主要有两种方法。一种方法是将病毒颗粒与某一靶向分子(Harari OA et al.1999 )或特异性抗体(Bartlett JS et al. 1999)偶联;另一种方法是通过改变病毒外壳蛋白的结构,使其对细胞的亲嗜性发生改变(Reynolds P et al. 1999;Krasnykh VN et al. 1996 )。

参考文献

Aderson RW. 1996. Forum'96: Gene Therapy. P21-24。

Alemany R, Lai S, Lou YC et al. 1999. Complementary adenoviral vectors for oncolysis. Krasnykh VN, Mikheeva GV. Douglas JT et al. 1996. Generation of recombinant adenovirus vectors with modified fibers for altering viral tropism. J Virol. 70:6839-6846.。

Lieber A, Steinwaerder.DS, Carlson CA et al. 1999. Integrating adenovirus-adeno-associated virus hybrid vectors devoid of all viral genes J Virol. 73:9314-9324。

Liu XL, Clark KR, Johnson PR. 1999. Production of recombinant adeno-associated virus vectors using a packaging cell line and a hybrid recombinant adenovirus. Gene Ther. 6:293-299。

Miller N and Whelan J. 1997. Progress in transcriptionally targeted and regulatable vectors for genetic therapy. Hum. Gene Ther. 8:803-815。

Pyles RB, Warnick RE, Chalk CL et al.1997 A novel multiply-mutated HSV-1 strain for the treatment of human brain tumors. Hum. Gene Ther. 8:533-544。

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我要DOS命令的大全

十四行诗第116首——莎士比亚。

Let me not to the marriage of true minds。

Admit impediments. Love is not love。

Which alters when it alteration finds,。

Or bends with the remover to remove:。

O no! it is an ever-fixed mark。

That looks on tempests and is never shaken;。

It is the star to every wandering bark,。

Whose worth's unknown, although his height be taken.。

Love's not Time's fool, though rosy lips and cheeks。

Within his bending sickle's compass come:。

Love alters not with his brief hours and weeks,。

But bears it out even to the edge of doom.。

If this be error and upon me proved,。

I never writ, nor no man ever loved.。

William Shakespeare。

(1564 - 1616)

一一六

我绝不承认两颗真心的结合

会有任何障碍;爱算不得真爱,

若是一看见人家改变便转舵,

或者一看见人家转弯便离开。

哦,决不!爱是亘古长明的塔灯,

它定睛望着风暴却兀不为动;

爱又是指引迷舟的一颗恒星,

你可量它多高,它所值却无穷。

爱不受时光的播弄,尽管红颜

和皓齿难免遭受时光的毒手;

爱并不因瞬息的改变而改变,

它巍然矗立直到末日的尽头。

我这话若说错,并被证明不确,

就算我没写诗,也没人真爱过。

cd 改变当前目录 sys 制作DOS系统盘 。

copy 拷贝文件 del 删除文件 。

deltree 删除目录树 dir 列文件名 。

diskcopy 制磁盘 edit 文本编辑 。

format 格式化磁盘 md 建立子目录 。

mem 查看内存状况 type 显示文件内容 。

rd 删除目录 ren 改变文件名 。

记得多少啊,忘了就去上课看看,下面四个命令是新的,给出命令格式,你自己试试看,学电脑重要的就是摸索。

cls 清屏

〔适用场合〕 屏幕上太乱了,或是屏幕上出现乱码了, 清除屏幕上显示内容但不。

影响电脑内部任何信息 。

〔用 法〕 cls 回车 。

move 移动文件,改目录名 。

〔适用场合〕 移动文件到别的目录 。

〔用 法〕 move [文件名] [目录] 移动文件至新目录下 。

move [目录名] [目录名] 改目录名 。

〔例 子〕 c:\>move c:\autoexec.bat c:\old� 。

移动autoexec.bat文件至old目录下 。

c:\>move c:\config.sys c:\temp� 。

移动config.sys文件至old目录下 。

more 分屏显示

〔适用场合〕 当输出很多一屏显示不下时采用,几乎适合所有命令,尤其是type。

等命令时很有用。 使用more时磁盘不能有写保护,也不适合光驱。

〔用 法〕 type [文件名] | more 分屏显示文件内容 。

more < [文件名] 分屏显示文件内容 。

〔例 子〕 C:\>type msdos.w40 | more 。

xcopy 拷贝目录和文件 。

〔适用场合〕 在进行连同子目录一起拷贝时很有用,在拷贝大量文件时比COPY命令。

要快得多

〔用 法〕 xcopy [文件名] [目录] 将指定文件拷贝到指定目录 。

xcopy [源目录] [目的目录] 将源目录连子目录考到目的目录下 。

xcopy *.* [目录] /s 将文件与非空子目录拷贝到指定目录 。

其它常用参数还有: v 拷贝后校验,会影响速度。

e 与s 相似,但即使子目录是空的也会拷贝。

help 帮助

〔适用场合〕 当您想具体了解DOS命令的使用方法时使用 。

〔用 法〕 help 提供所有DOS命令帮助 。

help [DOS命令] 提供有关命令的帮助 。

attrib 设置文件属性 。

〔适用场合〕 想对文件做较特殊的处理时 。

〔用 法〕 attrib 显示所有文件的属性 。

attrib +r或-r [文件名] 设置文件属性是否为只读 。

attrib +h或-h [文件名] 设置文件属性是否隐含 。

attrib +s或-s [文件名] 设置文件属性是否为系统文件 。

attrib +a或-a [文件名] 设置文件属性是否为归档文件 。

attrib /s 设置包括子目录的文件在内的文件属性 。

〔例 子〕 C:\TEST>attrib +r wina20.386 。

C:\>attrib +h *.* /s� 隐含所有文件 。

date 显示及修改日期 。

〔适用场合〕 想知道或修改时间和日期 。

〔用 法〕 date 显示和改变当前日期 。

〔例 子〕 C:\>date 09-20-1996� 将日期改为1996年9月20日 。

C:\>date� 。

Current date is Tue 08-20-1996 。

Enter new date (mm-dd-yy):09-20-1996 。

按月-日-年的顺序修改当前日期 直接按回车键忽略修改日期 。

lable 设置卷标号 。

〔适用场合〕 用来为磁盘做个标记 。

〔用 法〕 label 显示磁盘卷标 。

label [盘符] [卷标名] 设定指定盘的卷标 。

〔例 子〕 C:\>label� 。

Volume in drive C is WANG 。

Volume Serial Number is 2116-1DD0 。

volume label (11 characters,Enter for none)? 。

可以输入卷标,直接回车后 。

Delete current volume label (Y/N)? 。

按y删除旧卷标,按n不更改 。

defrag 磁盘碎片整理 。

〔适用场合〕 磁盘读写次数很多,或磁盘使用时间很长了,可能需要使用这条命令。

整理磁盘。磁盘碎片并不是指磁盘坏了,而只是由于多次的拷贝和删。

除文件后,磁盘使用会很不连贯,致使速度变慢。

doskey 调用和建立DOS宏命令 。

〔适用场合〕 经常需要输入重复的命令时,有非常大的用处 。

〔用 法〕 doskey 。

将doskey驻留内存,开辟出缓冲区,以后输入的命令都将保存在缓冲。

区中,可以随时调用 。

doskey [宏命令名]=[命令名] 。

将宏命令定义为命令,以后输入宏命令,电脑就会执行相应的命令 。

doskey /reinstall 重新安装doskey 。

doskey /bufsize= 设置缓冲区的大小 。

doskey /macros 显示所有doskey宏 。

doskey /history 显示内存中所有命令 。

doskey /insert|overstrike 设置新键入的字符是否覆盖旧的字符 。

〔例 子〕 C:\>DOSKEY� 。

C:\>dir 。

C:\>copy C:\temp\*.* a: 。

C:\>del c:\temp\*.* 。

C:\>copy b:\*.* c:\temp 。

上述四条命令都已被保存,用光标控制键的上下可以依次选择使用或。

修改, 也可以用F7键列出保存的所有命令。

C:\>doskey di=dir/w/p� 定义di为宏命令,意思是执行dir/w/p 。

fdisk 硬盘分区 。

〔建 议〕 只有硬盘被很利害的病毒感染时,或是一块新硬盘才需要分区,最好。

请懂行的人指导。硬盘都需经过低级格式化,分区,格式化三个步骤。

才可使用,成品电脑内的硬盘都已经做过这些加工了。

〔用 法〕 输入fdisk后按回车即可进入提示界面 。

emm386 扩展内存管理 。

〔建 议〕 这条命令比较复杂,在第五章中系统配置里将详细介绍 。

lh/loadhigh 将程序装入高端内存 。

〔适用场合〕 这条命令一般用在autoexec.bat中,当有些软件需要的基本内存很大。

时,它会有用 。

〔用 法〕 lh [程序] 。

将程序装入高端内存 使用此命令时,config.sys文件中需有下面两。

条语句。 device=emm386.exe dos=umb 。

lh [程序] /l:区号 将程序装入指定的umb区 。

lh /s 一般是由memmaker专用 。

〔例 子〕 C:\MOUSE\>lh mouse� 将鼠标驱动程序装入高端内存 。

memmaker 内存优化管理 。

〔适用场合〕 这个命令现在已经很少用了,在当年DOS流行时,想玩游戏可少不了 。

它,它可以腾出许多基本内存供游戏使用,只需安装一次即可 。

〔用 法〕 1. C:\>memmaker� 。

2. 回车继续,F3退出 。

3. 选择手动安装和自动安装,直接回车表示自动安装(回车得了)

4. 选择是否有程序需要扩充内存,可用空格键选择,Yes表示需要,

No不需要,按回车键即可。

5. 程序自动检测硬盘内是否安装了WINDOWS 。

6. 软驱中若有软盘则应将其取出,然后按回车键,电脑将重新起动。

两次,不要中断,只需按回车键。

(其实很简单,一直按回车键就行了,呵呵)

msd 系统检测 。

〔适用场合〕 用于检查系统信息 。

undelete 恢复被删除的文件 。

〔适用场合〕 当不小心删错了文件时,它可以用得上。

DOS删除文件时,只是将文件从分配表中去除,在磁盘存储区内将文。

件名的第一个字母删除,文件内容并未马上从磁盘中删除,所以能恢。

复。

〔用 法〕 undelete 恢复已删除的文件 。

undelete /all 恢复文件且不再询问是否恢复,

以"#%&-0123456789abcdefghijklmnopqrstuvwxyz"的顺序为第一个。

字母来恢复文件 。

undelete /list 列可恢复的文件名 。

undelete /s 可将undelete驻留内存,但几乎没人这样使用。

prompt 设置提示符 。

〔适用场合〕 当你厌烦了c:\>的提示符或者您想使您的提示符与众不同时,您可以。

试一试,非常有趣的DOS命令,可以随时显示时间与日期。

〔用 法〕 prompt $p$g 以当前目录名和>号为提示符,这是最常用的提示符 。

prompt $t 表示时间 prompt $d 表示日期 。

prompt $$ 表示$ prompt $q 表示= 。

prompt $v 表示当前版本 prompt $l 表示< 。

prompt $b 表示| prompt $h 表示退位符 。

prompt $e 表示Esc代表的字符 prompt $_ 表示回车换行 。

〔例 子〕 C:\DOS>prompt wang$g� 将wang>作为提示符 。

WANG>prompt $t$d$g� 使用时间、日期和>号做为提示符 。

0:01:07.77Thu 08-29-1996>prompt $p$g� 。

C:\DOS> 。

restore 恢复已备份的文件 。

〔建 议〕 如果以前用backup做过文件备份,则当原文件损坏时可以用它来恢复。

文件。

将用backup命令备份的磁盘中的文件恢复到另一磁盘中,备份磁盘中。

应有backup.00X和control.00X这两条文件。

〔用 法〕 restore [备份盘符] [目标盘符] 。

将备份盘上备份文件恢复到指定盘上 。

restore /s 将备份文件包括子目录都恢复到指定盘上 。

restore /p 让用户判断是否恢复文件 。

restore /b:日期 恢复日期以前的文件 。

restore /a:日期 恢复日期之后的文件 。

restore /l:时间 恢复时间之前的文件 。

restore /e:时间 恢复时间之后的文件 。

restore /m 只恢复上次备份后修改过的文件 。

restore /n 只恢复上次备份后已删 除的文件 。

restore /d 只显示要恢复的文件名 。

〔例 子〕 C:\DOS>restore a: c:� 。

Insert backup diskette 01 in drive A: 。

Press any key to continue . . . 。

在A驱中放入第一张备份盘,按任意键即可,恢复完第一张后,按顺。

序放入其它盘即可。

当您用上述命令不能正确恢复文件时请用:

C:\DOS>restore a: c:\ /s� 。

time 显示及修改时间 。

〔适用场合〕 用于显示及修改时间,用法同date 。

〔例 子〕 C:\DOS>time� 。

Current time is 12:15:26.04a 。

Enter new time: 11:20:20.00p 。

按时:分顺序输入时间,再加上下午(a/p)即可 直接按ENTER键可忽略。

修改时间。

set 设置环境变量 。

〔适用场合〕 设置声卡和路径等时用到 。

〔用 法〕 set [环境变量]=[字符串] 。

这条命令常常用在autoexec.bat中 。

〔例 子〕 C:\>set blaster=a220 i5 d1 设置声卡的参数 。

C:\>set path=c:\dos path c:\dos含义相同 。

smartdrv 设置磁盘加速器 。

〔建 议〕 它可以提高硬盘访问速度,最好在autoexec.bat文件中加载吧。

〔用 法〕 smartdrv /x 。

执行并驻留内存,开辟磁盘加速缓存区,并屏蔽所有驱动器缓存,是。

较常用的方法(一般用这个命令就够了)

smartdrv /c 将缓存内的信息都写入硬盘 。

smartdrv /e: 数字 设置一次移动的信息量 。

smartdrv /b: 数字 设置预先读取的缓冲区大小。

append 设置非执行文件的路径 。

〔适用场合〕 当您无法在多个目录中寻找到自己输入的文稿时,可以试一试这个命。

令,用法类似path。

〔用 法〕 append [路径];[路径] 。

〔例 子〕 C:\>append c:\test� 。

设置寻找非可执行文件路径为c:\test如果该目录下有文件1.txt时,

在其它目录下调用1.txt找不到时,可自动寻找到c:\test目录。

D:\UCDOS>edit 1.txt 可找到C:\test\1.txt文件 。

debug 程序调试命令 。

〔建 议〕 如果你学过汇编语言,那你应该会使用debug,如果没学过,最好别。

使用

〔用 法〕 debug [文件名] 。

diskcomp 比较磁盘 。

〔适用场合〕 比较两张盘是否相同,没想到什么时候会用到,在比较用diskcopy拷。

贝的两张盘,为什么不用diskcopy/v校验呢?

〔用 法〕 diskcomp [盘符1] [盘符2] 比较盘1和盘2 。

diskcomp /1 只比较磁盘的第一面 。

diskcomp /8 只比较没磁道的前8个扇区 。

〔例 子〕 C:\>diskcomp a: a: 。

在同一软驱中比较两张盘 。

Insert FIRST diskette in drive A: 。

放入第一张盘 。

Press any key to continue . . . 。

Comparing 80 tracks 18 sectors per track, 2 side(s) 。

Insert SECOND diskette in drive A: 。

放入第二张盘 。

Press any key to continue . . . Compare OK 。

比较未发现不同 。

Compare another diskette (Y/N) ?n 。

是否比较其它盘,选y继续比较,选n停止 。

expand 解压工具 。

〔适用场合〕 微软公司软件原始安装盘中有许多后缀以"_"结尾的压缩文件,可以 。

用它解压,解除您因为少数几个文件丢失造成的麻烦。

〔用 法〕 expand [源文件名] [目的文件] 。

〔例 子〕 C:\>expand a:vsafe.co_ c:\dos\vsafe.com 。

� 解压vsafe.co_为vsafe.com文件 。

Microsoft (R) File Expansion Utility Version 2.10 。

Copyright (C) Microsoft Corp 1990-1993. All rights 。

reserved. 。

Expanding a:vsafe.co_ to c:\dos\vsafe.com. a:vsafe.co_: 。

33046 bytes expanded to 62576 bytes, 89% increase. 。

C:\DOS> 。

fasthelp 快速显示帮助信息 。

〔建 议〕 可以看看所有的命令,对于单个的命令,还不如在命令名后加/?参数。

方便

〔用 法〕 fasthelp 列出所有DOS命令的用处 。

fasthelp [命令名] 显示命令的用处,等价于 [命令名]/? 。

fc 文件比较

〔建 议〕 也许对于大多数人是永远不会用到它的 。

〔用 法〕 fc [文件名1] [文件名2] 比较两文件的不同 。

参数还有: a c l Lbn n t w nnnn 。

〔例 子〕 C:\TEST>fc a.bat b.bat� 。

Comparing files A.BAT and B.BAT 。

***** A.BAT 。

choice /c:dme defrag,mem,end 。

if errorlevel 3 goto defrag 。

if errorlevel 2 goto mem 。

if errotlevel 1 goto end 。

***** B.BAT choice /c:dme defrag,mem,end 。

***** C:\TEST> 。

interlnk 启动简易网客户机 。

〔适用场合〕 如果有两台电脑可以通过它和intersvr联成简易的网络,这是条很有。

用的命令,但不常用 。

〔用 法〕 DOS新增支持网络的功能,

它可以使两台电脑通过并口线或串口线相联组成简易的网络 。

使用interlnk 必须在config.sys中增添一句:

device=c:\dos\interlnk 。

并口线的两头都应是25针公接头,针之间的连接如下图:对应 。

p2------------------------p15 。

p3------------------------p13 。

p4------------------------p12 。

p5------------------------p10 公接头指接头为带针的 。

p6------------------------p11 母接头指接头为带孔的 。

p15-----------------------p2 。

p13-----------------------p3 。

p12-----------------------p4 。

p10-----------------------p5 。

p11-----------------------p6 。

p25-----------------------p25 地线 。

〔例 子〕 C:\DOS\>interlnk Port-LPT1 。

this Computer Other Computer 。

(Client) (Server) 。

---------------------------------------- 。

E: equals A: 。

F: equals C: 。

在客户机中E盘即为服务机的A盘,F盘为服务机的C盘 。

intersvr 启动简易网服务器 。

〔适用场合〕 使用它,电脑就成了服务器了(只限与DOS提供的简易网)

〔用 法〕 intersvr 启动服务机 。

intersvr /lpt:1 启动服务机,用lpt1口作为数据传输口 。

intersvr /com:1 启动服务机,用com1口作为数据传输口 。

参数还有 x baud: b v rcopy (参见interlnk) 。

〔例 子〕 C:\DOS>intersvr� 。

qbasic 启动Basic集成环境 。

〔建 议〕 也许对于大多数人是永远不会用到它的 。

〔用 法〕 如果会qbasic语言,那么可以利用它编写自己的程序。edit.com必须。

有它才可用。

qbasic 起动basic语言环境 。

qbasic/editor 以全屏方式编辑语言 。

参数还有: b g h mbf nohi run 。

〔例 子〕 C:\DOS>qbasic�。

setver 设置版本 。

〔适用场合〕 当希望使用其它版本的dos命令时可以用它来欺骗电脑。在高版本 。

DOS中,某些旧版本程序需要DOS3.3时,可用setver来设置 。

〔用 法〕 使用时一般在config.sys中加入 device=setver.exe 。

setver 显示文件的版本 。

setver [文件名] n.nn 设置指定文件的版本号 。

〔例 子〕 C:\DOS>setver� 。

KERNEL.EXE 5.00 。

DOSOAD.SYS 5.00 。

EDLIN.EXE 5.00 。

BACKUP.EXE 5.00 。

ASSIGN.COM 5.00 。

EXE2BIN.EXE 5.00 。

JOIN.EXE 5.00 。

RECOVER.EXE 5.00 。

WINWORD.EXE 4.10 。

C:\> 。

若程序AAA.exe必须在MS-DOS3.3下执行,则键入 。

C:\DOS>setver aaa.exe 3.30� 。

又如net5.exe仅在MS-DOS5.0下执行,则在config.sys中加入 。

device=setver.exe后也可在Ms-DOS6.22下运行。

share 文件共享 。

〔建 议〕 只有在软件声明必须要运行它时才用 。

〔用 法〕 可在config.sys中加入 install=share.exe 也可直接运行 。

参数有 f l 。

subst 路径替换 。

〔建 议〕 一个非常有趣的命令,如果经常用光碟软件,可能有用。

〔用 法〕 subst 显示当前的替代路径 。

subst [盘符] [路径] 。

将指定的路径替代盘符,该路径将作为驱动器使用 。

subst /b 解除替代 。

〔例 子〕 C:\DOS>subst a: c:\temp� 用c盘temp目录替代a盘 。

C:\>subst a: /d� 解除替代。

tree 显示命令树结构 。

〔适用场合〕 查看所有的子目录 。

〔用 法〕 tree [盘符] 显示所有的子目录树 。

tree /f 显示目录时同时显示文件名 。

tree /a 以ASCII码显示目录树 。

〔例 子〕 C:\WINDOWS>tree /a� 。

unformat 恢复已被格式化的磁盘 。

〔建 议〕 你把有重要信息的软盘格式化了?快用unformat……什么?你用了 。

format /u,那死定了 。

〔用 法〕 unformat [盘符] 恢复指定的被格式化的磁盘 。

unformat /l 显示unformat所找到的文件名 。

〔例 子〕 C:\WINDOWS>unformat a:� 。

vsafe 病毒防护程序 。

〔建 议〕 把它装入内存可以随时检测出许多种病毒,是比较有用的。

〔用 法〕 vsafe 加载vsafe在内存中 。

vsafe /u 从内存中去除vsafe 。

vsafe/ne 将vsafe装入扩充内存 。

vsafe/nx 将vsafe装入扩展内存 。

参数还有 Ax Cx n d 。

〔例 子〕 C:\>vsafe。

原文地址:http://www.qianchusai.com/alters-110.html

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